Вертикальное разрешение
3D визуализация цифровых микроскопов основана на принципах фокусной вариации. Лимитированная глубина резкости оптики используется для получения детализированной информации об образце. Вертикальное перемещение образца позволяет получить информацию о фокусе и дистанции до оптики. На каждой вертикальной позиции, область изображения в фокусе отделяется от размытых областей, после чего обе области обрабатываются программным обеспечением для создания модели поверхности. Одно из преимуществ данного метода заключается в получении не только информация высоте, но и о текстуре образца.
Оптика
В микроскопии, глубина резкости, в большинстве случаев, определяется опытным путем. Данный параметр высчитывается отношениями числовой апертуры, разрешения и увеличения. Для наилучшего визуального отображения, регулируемые настройки современных микроскопов задают оптимальный баланс между глубиной резкости и разрешением. На низких увеличениях, глубину резкости можно значительно увеличить, понизив числовую апертуру. Тем не менее, чем ниже числовая апертура, тем ниже конечное разрешение. Поэтому, перед исследователями стоит задача - найти оптимальный баланс между разрешением и глубиной резкости.
Текстура образца
Текстура поверхности образца включает в себя все его особенности и характеристики. К ним относятся характеристики цвета и уровня яркости поверхности. Как описано выше, принцип фокусной вариации основывается на методическом подходе. Чем четче разделение сфокусированных и несфокусированных областей, тем лучше результаты модели поверхности. Данный метод отлично подходит для текстур с хорошей контрастностью. Также, огромное значение для успешного количественного анализа имеет правильное освещение. Выбор подходящего освещения делает возможным получение данных образцов с любыми текстурами.
